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2016年初，CRISPR/Cas9技术被英国人类繁育和胚胎学管理局批准，运用到人类胚胎上。承接这个备受争议的项目的正是弗朗西斯·克里克研究所。研究人员打算对人类胚胎进行基因编辑，并让其发育到第七天，以研究胚胎发育早期所必须的基因，以及流产的产生原因。但是经过基因编辑的胚胎不会继续发育下去，因此研究的最后，我们并不会得到一个所谓的“设计”出来的婴儿。
而2016年7月，中国科学家们力排众议，将CRISPR/Cas9真正运用到临床上去。这个消息当时就在世界范围内引起了轩然大波，自然杂志还特意为此发文。
该项目是由成都四川大学华西医院肿瘤专家卢铀所率领的。临床试验于7月6日获得医院审查委员会的道德批准。研究团队会将化疗、放疗均失败的非小细胞肺癌患者纳入临床试验。
卢铀的研究小组将从患者的血液中提取T细胞，然后使用CRISPR-Cas9技术在提取出的细胞中敲除一个基因。该基因编码的蛋白质为PD-1，通常用作检查细胞发起免疫应答的能力，以防止其攻击健康细胞。因此，理论上说，PD-1的敲除能够激活免疫应答。经过基因编辑的细胞会在实验室进行体外繁殖，而后再次注射进入患者的血液。卢铀的研究团队预期经过编辑的细胞会随着血液在全身流动，而后靶向在癌细胞处。
在2016年，FDA批准使用两种基于抗体的疗法阻断PD-1，以对抗肺癌。但是对于任何给定的患者来说，难以预测这些抗体将在多大程度上阻断PD-1，并激活免疫应答。相比之下，通过敲除基因来阻断PD-1的效果会更加直接有效，同时细胞增殖增加了反应的可能性。纽约Memorial Sloan Kettering癌症中心的免疫治疗临床研究人员Timothy Chan也表示：“这种方法会比抗体更有效。”
但是，正如我们之前提到的，人们对于CRISPR技术的脱靶效应还存在一定的担心。为了最小化CRISPR潜在的危害，华西医院的研究团队将和一家名为MedGenCell的生物技术公司合作，以保障基因敲除发生在正确的位置上，而后才会将细胞重新注入患者体内。
到了今天，以CRISPR/Cas9为代表的基因编辑技术在疾病治疗中的活跃程度已经远远超越了我们的想象。下面，小编就以杜氏肌营养不良症（DMD）为例，讲讲CRISPR/Cas9技术是如何给患者带来希望的。
杜氏肌营养不良症是一种X染色体隐性遗传病，因此表现出临床症状的多是男孩。全球平均每5000个出生的男婴中就会有一个患有DMD。虽然大部分患者的患病基因来自父母，但是还有大约三分之一的患者是由于新出现的基因突变导致的。患者多会在儿童早期出现肌肉退化，行走困难等表型，并最终失去行走能力。至今为止，DMD还没有能够根治的疗法。DMD患者大部分会在20岁左右死于心肺无力。
引起DMD的突变基因名为肌营养不良蛋白（dystrophin）。肌营养不良蛋白负责通过含有许多亚基的蛋白质复合物，将每根肌纤维的细胞骨架连接到下面的基底层（细胞外基质）。 肌营养不良蛋白的缺乏使得过量的钙穿透肌膜。钙和信号通路的改变会进一步导致过量的水进入线粒体，然后细胞爆裂。在DMD患者中，肌营养不良蛋白的突变导致其功能的缺失，而后影响肌肉细胞的存活和功能。
肌营养不良蛋白是人体中非常大的一个蛋白，其功能难以通过小分子药物进行调节，现有的很多研究通过线粒体调节等间接的方式来缓解DMD患者的症状，但是还远远达不到治愈的效果。作为一个遗传疾病，基因编辑技术的治疗潜力就凸显出来了。
Serapta公司在DMD新疗法开发方面做出了不俗的贡献。其今年就得到了杜克大学的授权，使用CRISPR/Cas9对DMD患者进行基因编辑。该治疗技术是由杜克大学生物医学工程系副教授Charles A.Gersbach所带领的团队开发的。其通过切除突变肌营养不良蛋白基因中的外显子，达到外显子跳跃的目的，从而部分恢复肌营养不良蛋白的表达以及功能，以期待缓解患者的表型。理论上说，该技术适用于肌营养不良蛋白不同类型的突变引起的疾病。目前该疗法还处于研发状态，没有进入临床试验。
当然，CRISPR/Cas9作为一个大热的疗法，Serapta不是唯一一家被其吸引的制药公司。Exonics公司也十分看好CRISPR/Cas9技术在DMD上的治疗潜力。Exonics公司设计利用病毒AAV将含有CRISPR/Cas9的质粒转染进入患者细胞，改善其肌肉功能。该公司宣称，患者只需要进行一次治疗就可以达到比较长期的改善效果。
Exonics公司的设计是利用CRISPR/Cas9技术在肌营养不良蛋白的基因上面造成一个单一的切口，细胞将会利用非同源末端连接的方式将CRISPR/Cas9引起的DNA损伤修复。由于没有同源修复模板，修复的过程中基因组上会形成新的突变，这对于肌营养不良蛋白外显子跳跃，无义突变或是终止子突变带来的功能缺失具有一定的修复作用。此外，至今为止，Exonics公司还没有检测到治疗过程中CRISPR/Cas9引起的脱靶毒性，因此安全性暂时还不是一个很大的问题。
由此可知，作为一个新兴技术，CRISPR/Cas9在科研和临床上都很受追捧。我们也期待其能够在伦理的监督下，成为治愈遗传疾病的那颗银色子弹。
如何规范基因编辑技术的合理应用，如何促进基因编辑技术的临床转化，是值得探讨的问题。另外也有许多科研工作者和临床医生关心基因治疗的临床进展。为此，生物谷将举办2018基因编辑与基因治疗国际研讨会，邀请国内外一线专家, 临床医生深入研讨，推动交流与合作。
时间地点：3月23日－24日 上海
会议规模：300人
会议形式：演讲 + 讨论
会议议题：
基因编辑科学研究
– 新型基因编辑技术: 单碱基基因编辑
– 基因编辑效率与脱靶
– 基因编辑技术与疾病动物模型
– 原位基因编辑（活体基因编辑）
– 基因编辑技术在合成生物学的应用
– RNA 编辑技术
基因编辑临床应用
– 基因编辑改造的免疫细胞治疗
– 基因编辑与新药研发
– 基因编辑技术治疗罕见病
– 基因编辑技术治疗先天性遗传病
– 基因编辑用于肠道菌群
– 基因编辑技术面临的安全与伦理
基因治疗
– 基因编辑技术与基因治疗
– RNAi 干扰与基因治疗
– 基因治疗临床试验
– 体外基因的有效递送
– 基因治疗药物的发展策略与成果转化
– 基因治疗的安全性
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参考文献
http://www.nature.com/news/chinese-scientists-to-pioneer-first-human-crispr-trial-1.20302
http://investorrelations.sarepta.com/news-releases/news-release-details/sarepta-therapeutics-and-nationwide-childrens-hospital-announce
http://www.nationwidechildrens.org/dr-paul-martin-discusses-galgt2-gene-therapy-for-muscular-dystrophy
http://investorrelations.sarepta.com/news-releases/news-release-details/sarepta-therapeutics-signs-exclusive-global-collaboration-duke
https://www.pfizer.com/news/press-release/press-release-detail/pfizer_aims_to_become_industry_leader_in_gene_therapy_with_aquisition_of_bamboo_therapeutics_inc